Отбор биологических образцов трупов

В стандартных генетических экспертных исследованиях изучают образцы жидкой или высушенной крови трупов. При необходимости вместо образцов крови анализу могут подвергаться и другие объекты: слюна, мазки (соскобы) со слизистой оболочки ротовой полости, абортивный материал, отдельные кости и их фрагменты, мягкие ткани и др.

Допускается проведение сравнительного анализа объектов, используя препараты ДНК, которые были выделены из биологических образцов разного тканевого происхождения.

На основе результатов практических наблюдений проведенных генетических исследований нами были разработаны и предложены следующие рекомендации по изъятию, хранению и транспортировке биологических объектов на генетические исследования.

Костная ткань

Костная ткань исследовалась при обнаружении скелети-рованных и термически измененных трупов, при эксгумации. Оптимальными объектами для проведения генетических исследований являются рукоятка грудины и крупные трубчатые кости (бедренная, большеберцовая). Наихудшие результаты были получены при исследовании костей, которые хранились в условиях повышенной температуры (до 40 °С) и влажности (в канализационных колодцах, водоемах, во влажной земле).

Кость следует представлять в целом виде для визуального выбора подходящего участка компактного вещества кости для исследования. Кости промывают проточной водой, отчищают от мягких тканей, высушивают и упаковывают в бумажный сверток.

Нельзя использовать для упаковки всех биологических объектов полиэтиленовые пакеты и пластиковую емкость, так как они ускоряют гнилостные процессы. Кости хранят в условиях морозильной камеры при температуре -18 °С.

Зубы

Зубы исследовались в случаях обнаружения скелетированного черепа, а при отсутствии трубчатых костей или невозможности их транспортировки и хранения. ДНК в корнях зубов не подвержена воздействию внешних физических и химических факторов, поэтому в 68 % случаев удавалось получить полный генотип.

Рекомендуется выбирать зубы без пломб, так как в запломбированных каналах корней зубов отсутствует пульпа. Зубы необходимо промывать проточной водой, высушивать и упаковывать в бумажный пакет, хранить при комнатной температуре либо при температуре от +4 °С до -18 °С.

Мышечная ткань

Мышцы исследовались в случае малого количества крови при фрагментации тел от взрывной и авиационной травмы, при пожарах. Изымают фрагмент мышц красного цвета из крупных мышц конечностей или ягодичной мышцы размерами 0,5×0,5 см, помещают в стерильную пробирку вместе с вырезкой стерильной марли в 2-4 слоя. На марле может остаться отпечаток крови, который также может быть подходящим объектом для исследования.

Встречались случаи предоставления мягких тканей (мышц, кожи) в 10 % нейтральном формалине, которые хранились при комнатной температуре в те-чение месяца, что не ухудшило результатов исследования. Однако материал мягких тканей, который хранился в 10 % нейтральном формалине год, оказался непригоден вследствие деградации ДНК, поэтому рекомендуемые сроки исследования такого материала – не более 1 года.

Волосы

Волосы исследовались в случаях отсутствия иных биологических образцов, например, при отсутствии подозреваемого или потерпевшего на момент назначения исследования, при отказе сдать образцы. В луковицах волос содержится достаточное количество ДНК, в вырванных ее больше, чем в выпавших.

Наилучшие результаты были получены при одномоментном исследовании не менее 3 луковиц вырванных волос. Волосы не промывают, поскольку на них могут находиться потожировые следы владельца, помещают в бумажный пакет, хранят при комнатной температуре.

Парафиновые блоки

Парафиновые блоки – это материал, который хранится в архиве гистологического отделения до 3-х лет и поэтому представляет собой особую ценность в случаях захоронения трупа и при отсутствии другого биологического материала.

Для исследования желательно предоставлять все имеющиеся блоки, так как эксперт, не имея информации о том, какая из тканей находится в лучшем состоянии, использует одновременно фрагменты нескольких кусочков. Парафиновые блоки могут храниться в бумажных пакетах при комнатной температуре (не бо-лее 45 градусов во избежание плавления парафина), без доступа прямого сол-нечного света.

Плодный материал

Абортивный материал, амниотическая жидкость и плодная часть плаценты исследовались при расследовании уголовных дел в случаях убийства беременной женщины, прерывания беременности в результате изнасилования, а также при назначении экспертиз в случаях привлечения к уголовной ответственности медработников перинатальных центров.

Если доставка в течение первых суток невозможна, то абортивный материал необходимо поместить в морозильную камеру при температуре -18 °С на срок не более 4 недель, а затем доставить в термоконтейнере с хладоэлементами. Доставка абортивного материала в высушенном виде (на фрагментах марли) на сроках до 12 недель нежелательна, так как при таких условиях не представляется возможным отделить следы эмбриона от материнских следов.

Для генетического исследования плаценты определяют ее плодную поверхность, покрытую амнионом, берут фрагмент амниона размерами 0,5×0,5 см в стерильную пластиковую пробирку. Условия транспортировки и хранения аналогичны таковым абортивного материала.

Кровь

Образцы крови трупа рекомендуется забирать из полостей сердца или из бедренных вен, при этом избегать попадания в нее жировой ткани, которая может в дальнейшем ухудшить качество препаратов ДНК. Кровь берут на стерильный марлевый тампон, сложенный в 2-4 слоя, или на фильтровальную бумагу, пропитывая участок диаметром 4,0 см.

Далее тампон высушивают на листе чистой бумаги при комнатной температуре в чистом помещении морга. Высушиваемые образцы нельзя помещать вблизи нагревательных приборов, подвергать прямому воздействию солнечных лучей, загрязнению.

Необходимо следить за стерильностью тампона, поскольку встречались случаи загрязнения его чужеродной ДНК и выявления генетического профиля двух и более лиц. Образцы жидкой крови для генетических исследований брать не рекомендуется, так как при комнатной температуре ДНК в жидкой крови разрушается в течение 8-12 часов.